革兰氏染色方法的改进

固　革兰氏染色方法的改进　刘屹峰　（丹东师范高等专科学棱实验中心，辽宁丹东１］８ｅｏ３）　摘关键词：革兰氏染色　２鞍００山２－０师３．矗４《　蘸ｉｊ｛６７学—报６７　要：在不改变实验结果的前提下．改进革兰氏染色法．将四步操作简化为三步操作　文献标识码：Ａ　文章篇号：］００８－２４４］（２ｏｏ２）ｏ］－００６７￣１　中图分类号：Ｑ９３—３３　Ｔｈｅ　Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇｒａｍ　Ｓｔｒａｉｎ　Ｍｅｔｈｏｄ　ＬＩＵ　Ｙｉ－ｆｅｎｇ　（娜ｅ　Ｃｅ￣ｅｒ，Ｄａａｔｌｏｎｇ　Ｔｅａｃｌ￣ｒｓ　ｃ　，Ｄａｎｄｏｎｇ　Ⅲ　１］８００３．ｃ　）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｂｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｇｒａｍ　Ｓｔｒａｉｎ　ＷａＳ　ｉｍｐｒｏｖｅｄ．ｗｈｉｌｅ　ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　Ｗ￣￥ｒｌ’ｔ　ｃｈ￣ｇｅｄ．Ｆ０ｕｒ．ｓｔｅｐ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　Ｗ；［ＩＳ　ｓｉｍｐｌｉｉｆｅｄ　ｔｏ　ｔｈｒｅｅ・ｓｔｅｐ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｇｒａｍ　ｓ缸巳ｉｎ　１材料　（Ｉ）结晶紫染色液：甲液——结晶紫２ｇ，９５％乙醇２０ｍＬ；乙液——草酸铵０．８ｇ，蒸馏水８ＯｒａＬ甲乙　两液先分别溶解，然后混合在一起，过滤．（２）碘液：碘１ｇ，碘化钾２ｇ，蒸馏水ｌＯＯｍＬ先取少量蒸馏水加　人碘和碘化钾，使碘完全溶解后再加人全部蒸馏水．（３）复红酒精溶液：碱性复红０．４ｇ，９５％乙醇　ｌＯＯｍＬ．充分溶解．（４）大肠杆菌和金黄葡萄球菌分别制成菌悬液．　２方法　（１）取洁净载玻片数张，平放桌上，取一环大肠菌菌液放置于各玻片的左端，涂布成一个直径ｌ—　１．５ｅｍ的圆形涂片，自然干燥．（２）取一环金黄葡萄球菌菌液放置于大肠杆菌涂片的，使成０．５ｃｍ　左右的葡萄球菌液区，自然干燥．（３）在上述涂片的右侧，放上ｌ一２滴生理盐水，取大肠杆菌和葡萄球　菌菌液各一环，分别制成涂片，自然干燥后，与左侧双重涂片同时火焰固定，使细菌固定于载玻片上．　（４）在细菌涂片上加上结晶紫染色液，染ｌ一２ｍｉｎ，水洗，除尽水滴．（５）在涂片上加上碘赦，平放ｌ一　２ｒａｉｎ，水洗，除尽水滴．（６）在涂片上加上复红酒精溶液，平放５Ｏ一６０ｓ，水洗，自然干燥后用油请镜检．　３结果与结论　双重涂片区可见染成浅红色的革兰氏阴性的大肠杆菌和染成深紫色的革兰氏阳性的葡萄球菌同时　存在，而在交界区的外侧只能见到单一的浅红色的大肠杆菌或深紫色的葡萄球菌，界限分明，容易识别．　从方法２的（１）一（３）步中，可以看出本实验可以确保实验结果的正确性．从方法２的（４）一（６）步　的新法中可以看出，实验的基本原理设有改变，只是把酒精褪色和复染的两步合并在一步中进行，使用　０．４％复红酒精溶液作为复染剂，可以达到褪色和复染的双重目的，效果良好．另外，染色结果的可靠性　也取决于被检细菌的状态，只有新鲜培养的细菌才能正确反映染色结果．　收稿日期：２００１一ｏ５—２４　作者简介：刘屹峰（１９６６一）．女，吉林伊通人，丹东师专实验中心实验师　露