重庆医学２０１７年６月第４６卷第ｌ８期 ２５ｌ５ 论著・临床研究ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—８３４８．２０１７．１８．０２３ ＵＣ患者ＰＢＭＣ中ＴＬＲ４、ＮＦ—ＫＢ水平的变化及其临床意义 马永刚 ，高芙蓉 ，卞 巍。 （１．浙江省总队医院嘉兴医院消化内科，浙江嘉兴３１４０００；２．浙江省总队医院嘉兴医院放射科， 浙江嘉兴３１４０００；３．浙江省嘉兴市妇幼保健医院放射科３１４０００） ［摘要］ 目的 探讨溃疡性结肠炎（Ｕｃ）患者外周血单核细胞（ＰＢＭｃ）中ＴＯＬＬ样受体（ＴＬＲ）４、Ｎ卜ＫＢ水平的变化及在ＵＣ 发病中的可能机制。方法 选取浙江省总队医院嘉兴医院消化科２０１４年１月至２０１５年１月收治的ＵＣ患者３Ｏ例作为观察 组，另选取该院体检科健康体检者１Ｏ例作为对照组。采用流式细胞仪检测外周血ＣＤ１４ 单核细胞表面ＴＬＲ４阳性表达率，ＲＴ＿ ＰＣＲ检测ＴＬＲ４、髓样分化因子８８（ＭｙＤ８８）、ＮＦ－ＫＢ（Ｐ６５）ｍＲＮＡ表达水平，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＴＬＲ４、Ｍ：ｙＤ８８、ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）蛋白 水平。结果观察组外周血ＣＤ１４。。单核细胞表面ＴＬＲ４阳性表达率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；对照组ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ－ＫＢ （Ｐ６５）ｍＲＮＡ及蛋白水平明显低于观察组（Ｐ＜０．０１）；ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）蛋白水平与ＵＣ严重程度呈正相关。 结论 ＵＣ患者ＰＢＭＣ中ＴＬＲ４、ＮＦ＿ＫＢ明显增高，临床可通过检测ＴＬＲ４、ＮＦ—ＫＢ水平判断ＵＣ的发展程度。 ［关键词］ 结肠炎，溃疡性；单核细胞；ＴＯＬＬ样受体４；ＮＦ－￣Ｂ ［中图分类号］ Ｒ５７４．１ ［文献标识码］ Ａ ［文章编号］ １６７１—８３４８（２０１７）１８—２５１５—０３ Ｃｈａｎｇｅｓ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ＴＬＲ４ ａｎｄ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ ｋａｐｐａ Ｂ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ Ｍａ Ｙｏｎｇｇａｎｇ 。Ｇａｏ Ｆｕｒｏｎｇ 。Ｂｉａｎ肌 。 （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ，Ｊｉａｘｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ ＺｈｅｎｇＪｉａｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ａｒｍｅｄ Ｐｏｌｉｃｅ Ｃｏｒｐｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉａｘｉｎｇ，Ｚ ｅｊｉａｎｇ ３１４０００，Ｃｈｉｎａ；３．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ， ＪｉａｘｉｎｇＭａｔｅｒｎａｌ ａｎｄ Ｃｈｉｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉａｘｉｎｇ，Ｚｈｅｊｉａｎｇ ３１４０００，Ｃｈｉｎａ） ［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ＴＬＲ４ ａｎｄ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ ｋａｐｐａ Ｂ（ＮＦ＿ＫＢ）ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ（ＰＢＭＣ）ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ（ＵＣ）ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｉｎ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｆｒｏｍ Ｊａｎｕａｒｙ ２０１４ ｔｏ Ｊａｎｕａｒｙ ２０１５，３０ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＵＣ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ ｏｔｈｅｒ １０ ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ ｕｎｄｅｒ— ｇｏｉｎｇ ｈｅａｌｔｈｙ ｐｈｙｓｉｃａｌ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｉｓ ｈｏｓｐｉｔａｌ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｐｏｓｉ— ｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＴＬＲ４ ｏｎ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ１４＋ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＬＲ４，ＭｙＤ８８，ＮＦ—ＫＢ（Ｐ６５） ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＲＴ－ＰＣＲ．Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ ｗａｓ ａｄｏｐｔｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＬＲ４，ＭｙＤ８８，ＮＦ－－ＫＢ（Ｐ６５）ｐｒｏ— ｔｅｉｎ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ＴＬＲ４ ｏｎ ｔｈｅ ｓｕｒｆａｃｅ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ１４ ｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．０５）；ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＬＲ４，ＭｙＤ８８ ａｎｄ ＮＦ一￣Ｂ（Ｐ６５）Ｂ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．０５）；ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＬＲ４，ＭｙＤ８８ ａｎｄ ＮＦ－￣Ｂ（Ｐ６５）ｐｒｏｔｅｉｎ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｏｆ ＵＣ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＴＬＲ４ ａｎｄ ＮＦ－ｘＢ ｉｎ ＰＢＭＣ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＵＣ ａｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ，ｃｌｉｎｉｃ ｃａｎ ｊｕｄｇｅ ｔｈｅ ＵＣ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｄｅｇｒｅｅ ｂｙ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ＴＬＲ４ ａｎｄ ＮＦ－ｘＢ ｌｅｖｅｌｓ． ［Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ］ ｃｏｌｉｔｉｓ，ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ；ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ；ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ４；ＮＦ－ｋａｐｐａ Ｂ 溃疡性结肠炎（ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ，ＵＣ）是炎症性肠病（ｉｎ— ｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｂｏｗｅｌ ｄｉｓｅａｓｅ，ＩＢＤ）的一种，临床主要表现为反复 的腹痛、腹泻、黏液血便、里急后重等，严重者可导致失血性休 克 ］。ＵＣ的发病机制与遗传、感染、免疫异常、心理及环境等 因素有关。目前的研究认为人体免疫功能的紊乱可能是ＵＣ 病情发生、发展的主要影响因素，而ＴＯＬＬ样受体（ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅ— ｃｅｐｔｏｒｓ，ＴＬＲｓ）可能与ＵＣ密切相关＿２ ］。ＴＬＲｓ可启动由髓样 ２０１４年１月至２０１５年１月收治的ＵＣ患者３０例作为观察组， 其中男１６例，女１４例，年龄２９～６３岁，平均（４０．８２±８．３２） 岁，病程３个月至１２年，平均（４．３５±０．８３）年。３Ｏ例ＵＣ患者 依据病情严重程度分为轻度组（ｎ一８）、中度组（ｎ一１２）、重度组 （ 一１０）。另选取该院体检科正常体检者１Ｏ例作为对照组，其 中男５例，女５例，年龄３Ｏ～６４岁，平均（３５．０２±１１．２２）岁，两 组对象性别、年龄比较，差异无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。所有 对象均签署了知情同意书，对试验内容了解。本研究获得该院 分子因子８８（ＭｙＤ８８）介导的ＮＦ＿ＫＢ下游炎症反应信号通 路＿４ ］。本研究比较健康者和ＵＣ患者ＴＬＲ４、ＮＦ— Ｂ表达水 伦理委员会批准。３Ｏ例ＵＣ患者均符合２００７年５月济南全国 ＩＢＤ研讨会修订的《对我国ＩＢＤ诊断治疗规范的共识意见》中 平的差异，探讨ＴＬＲ４、ＮＦ＿ Ｂ在Ｕｃ发病中的可能机制。 １资料与方法 的诊断标准。患者排除具有其他自身免疫性疾病，排除结核、 肝炎、肿瘤等疾病，排除细菌性痢疾、阿米巴痢疾、慢性血吸虫 １．１ 一般资料 选择浙江省总队医院嘉兴医院消化内科 作者简介：马永刚（１９７５一），主治医师，本科，从事消化内科疾病的诊治研究。 ２５１６ 重庆医学２０１７年６月第４６卷第１８期 表１ 引物序列（５＇－３ ） 病、肠结核等感染性结肠炎。Ｕｃ的分级标准参考《对我国ＩＢＤ ＮＡ表达水平比较对照组ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ—ＫＢ（Ｐ６５）ｍＲ 诊断治疗规范的共识意见》，轻度：腹泻低于４次／天，便血轻或 无，无发热、脉搏加快或贫血，红细胞沉降率（ＥＳＲ）正常 中 度：腹泻次数４～６次／天，便血轻中度。重度：腹泻每天６次以 上，伴明显黏液血便，体温高于３７．５℃，脉搏每分钟９ｏ次以 上，血红蛋白（Ｈｂ）＜１００ ｇ／Ｌ，ＥＳＲ＞３０ ｍｍ／ｈ ｊ。 １．２方法 １．２．１ 主要仪器和试剂Ｔ Ｇｒａｄｉｅｎｔ型ＰＣＲ仪（Ｂｉｏｍｅｔｒａ公 司）；ＧＩＳ凝胶成像分析系统（上海天能科技有限公司）；冷冻高 速离心机（德国Ｅｐｐｅｎｄｏｒ公司）；琼脂糖水平电泳槽（北京六一 仪器厂）；超低温冰箱（ＥＩ本三洋公司）；ＰＣＲ扩增试剂盒（Ｆｅｒ— ｍｅｎｔａｓ公司）；ＰＣＲ引物（上海生物工程有限公司）；Ｔｒｉｚｏｌ（Ｉｎ— ｖｉｔｒｏｇｅｎ公司）；流式细胞仪（美国Ｂｅｃｔｏｎ ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ公司）； ＣＤ１４－ＦＩＴＣ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ公司）。 １．２．２标本采集及检测方法两组对象均于清晨空腹采集静 脉血液，肝素抗凝，３ ０００ ｒ／ｒａｉｎ分离获得血浆，一８Ｏ℃保存待 测。利用密度梯度离心法分离外周血单核细胞（ＰＢＭＣ），调整 细胞浓度为ｌ×１ｏ 个／ｍＬ，接种于２４孔板，细胞培养４ ｈ后， 洗脱未贴壁的细胞，获得贴壁的ＰＢＭＣ。置于３７℃、５ ＣＯ 培养箱中培养２４ ｈ后收获细胞。采用双色荧光法进行 ＣＤ１４ 单核细胞上ＴＬＲ４阳性率的检测，用Ｃｅｌｌ Ｑｕｅｓｔ软件 进行获取和分析数据＿８］。１００ⅡＬ细胞悬液（５×１０ 个／ｍＬ）， 加入ＣＤ１４一ＦＩＴＣ，ＣＤ２８４一ＡＰＣ抗体各１Ｏ Ｌ，４℃避光孵育３ｏ ｒｎｉｎ，ＰＢＳ清洗２次，加入３００ Ｌ ＰＢＳ上机检测。ＲＴ—ＰＣＲ检 测：提取单核细胞ＲＮＡ，依次加入ＲＮＡ、Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ１８）、双蒸 水，总体积为１２．５Ｏ Ｌ，６５℃５ ｒａｉｎ，冰浴５ ｒａｉｎ，加入ＲＮａｓｅ 抑制剂、Ｂｕｆｆｅｒ、ｄ ＮＴＰｓ、Ｍ—Ｍｕ ＬＶ，４２℃１ ｈ，７０℃１０ ｒｎｉｎ，冰 浴５ ｒａｉｎ，ＲＴ—ＰＣＲ以ＧＡＰＤＨ为作为内参基因，实时荧光试 验结果采用２ 的数据统计方法分析基因的相对表达。引 物序列见表１∞ 。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测：胰酶消化离心获得细胞， 加入冰预冷裂解缓冲液，高速冷冻离心机离心获得蛋白，十二 烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），湿法转膜，封 闭处理，加人抗体孵育，加入辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的二 抗，室温下孵育２ ｈ，将显影液置于ＮＣ膜上，凝胶成像仪成像。 １．３统计学处理 采用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行分析，计量 资料以 ±Ｓ表示，组间比较采用ｔ检验，以Ｐ＜０．０５为差异有 统计学意义。 ２结 果 ２．１两组对象外周血ＣＤ１４。。单核细胞表面ＴＬＲ４阳性表达 Ｅ较对照组外周血ＣＤ１４ 单核细胞表面ＴＩ Ｒ４阳性表达率 为（Ｏ．Ｏ９＿－４－０．０２） ，观察组外周血ＣＤ１４。。单核细胞表面ＴＬＲ４ 阳性表达率为（１．８Ｏ±０．０６） ，观察组外周血ＣＤ１４ 单核细 胞表面ＴＩ Ｒ４阳性表达率明显高于对照组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ５）。 ２．２ 两组对象ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ—ＫＢ（Ｐ６５）ｍＲ— ＮＡ水平明显低于观察组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），见表２。 表２ 两组对象ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ～ｔｃＢ （Ｐ６５）ｍＲＮＡ表达水平比较（ ±Ｓ） ：Ｐ＜Ｏ．Ｏ１，与对照组比较。 ２．３两组对象ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ－￣ｃＢ（Ｐ６５）蛋白 水平比较对照组ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ—ＫＢ（Ｐ６５）蛋白水平明显 低于观察组（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１），见表３。 表３ 两组对象ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、 ＮＦ一 Ｂ（Ｐ６５）蛋白水平比较（ｊ±ｓ） ａ：Ｐ＜Ｏ．０１，与对照组比较。 ２．４ ＵＣ不同组别ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ一￣ｃＢ（Ｐ６５）蛋 白表达水平比较ＴＬＲ￣、ＭｙＤ８８、ＮＦ＿ Ｂ（Ｐ６５）蛋白表达水平 与ＵＣ严重程度呈正相关，ＵＣ重度组ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ—ＫＢ （Ｐ６５）蛋白表达明显高于ＵＣ轻、中度组（Ｐ＜０．Ｏ１）；ＵＣ中度 组ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、ＮＦ＿ＫＢ（Ｐ６５）蛋白表达明显高于ＵＣ轻度组 （Ｐ＜０．０１），见表４。 表４ ＵＣ不同组别ＰＢＭＣ表面ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８、 ＮＦ—ＫＢ（Ｐ６５）蛋白表达水平比较（ｊ土Ｓ） ａ：Ｐ＜Ｏ．Ｏ１，与ＵＣ重度组比较； ：Ｐ＜Ｏ．０１，与ＵＣ中度组比较。 ３讨 论 ＵＣ是ＩＢＤ的一种，是病因未明的、以侵犯结肠为主的慢 性炎症，该病病程长、易复发、与直结肠癌的发病有着重要联 系。西方国家，ＵＣ发病率为７／１０万人＿１ ；亚洲，ＵＣ发病率 为１～２／１０万人。ＵＣ的发病机制尚未明确，环境、遗传、感染 和免疫因素相结合导致肠道黏膜炎症，然后黏膜病变，黏膜修 复。尽管发病机制尚未明确，机体免疫系统对肠道正常菌群的 免疫反应异常是其发病的重要因素ｌ＿１ 。 哺乳动物中已发现的ＴＩ Ｒｓ有１３种，其中，人类至少有１Ｏ 种。ＴＬＲｓ表达在各种免疫细胞上，其中ＴＬＲ４主要表达于单 重庆医学２ｏ１７年６月第４６卷第ｌ８期 ２５１７ 核一巨噬细胞、树突状细胞表面，ＴＬＲ４通过选择性识别 ／－５］吴玉泓，许雅清，李海龙，等．久泻灵颗粒对脾。肾阳虚型溃 ＰＡＭＰｓ［￣ＩＩ脂多糖（ＬＰＳ）、鞭毛蛋白和微生物核酸等］，触发 疡性结肠炎大鼠ＴＬＲ４及ＮＦ－￣Ｂ ｐ６５表达的影响［Ｊ］．中 ＭｙＤ８８依赖性和非依赖性途径，最终活化ＮＦ－￣Ｂ，导致肿瘤坏 国实验动物学报，２０１６，２４（１）：４７—５２． 死因子ａ、白细胞介素ｌＢ等炎性细胞因子及趋化因子的释放， Ｅ６］李晨．芍黄安肠汤对溃疡性结肠炎ＴＬＲ４／ＭｙＤ８８／ＮＦ－ｋＢ 诱导炎症的发生＿１ 。ＴＬＲ４识别的外源性配体主要为脂多 信号通路的干预作用［Ｄ］．南京：南京中医药大学，２０１４． 糖，内源性配体主要包括坏死细胞、热休克蛋白等。活化的通 ［７］Ｍｅｅｎａ ＮＫ，Ｖｅｒｍａ Ｒ，Ｖｅｒｍａ Ｎ，ｅｔ ａ１．ＴＬＲ４ Ｄ２９９Ｇ ｐｏｌｙ— 过信号转导介导肠道黏膜的免疫反应口 。 ｍｏｒｐｈｉｓｍ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏ 本研究比较了健康者与ＵＣ患者之间ＰＢＭＣ的ＴＬＲ４、 ｌｉｔｉｓＦＪ］．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１３，４７（９）：７７３—７８０． ＭｙＤ８８和ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）表达差异，ＵＣ患者ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８和 ［８］朱灵，周军，曹海军，等．雷公藤多苷通过抑制ＴＬＲ４／ＮＦ一 ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）无论在基因水平还是蛋白水平均明显高于对照 Ｂ信号通路抑制小鼠结肠炎症［Ｊ］．胃肠病学，２０１５，２０ 组，说明ＴＬＲ４和ＮＦ－￣Ｂ（Ｐ６５）与ＵＣ的发病相关。ＴＬＲ４表 （１０）：６０６—６１１． 达异常可能与ＬＰＳ耐受有关，Ｕｃ肠道菌群失调，宿主肠黏膜 ［９］Ｒａｈｍａｎ ＦＺ，Ｓｍｉｔｈ ＡＭ，Ｈａｙｅｅ Ｂ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｌａｙｅｄ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ 对ＬＰＳ的耐受性降低，外周血ＴＬＲ４大量表达，并与ＬＰＳ结 ｏｆ ａｃｕｔｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ 合，激活ＴＬＲＳ－ＭｙＤ８８一ＩＲＡＫ—ＮＦ～ｘＢ（Ｐ６５）的转导途径，募集 ｗｉｔｈ ｅｌｅｖａｔｅｄ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｒｅｌｅａｓｅ ｄｏｗｎｓｔｒｅａｍ ｏｆ ＴＬＲ４ ＥＪ］． 炎性细胞，释放自由基，损伤黏膜［１ 。在进一步的分析中， Ｓｙｓｔ Ｒｅｖ，２０１０，５（３）：１０９５—１０９８． ＴＬＲ４、Ｍ［ｙＤ８８、ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）蛋白表达水平与ＵＣ严重程度呈 ［１Ｏ］Ｔａｎ Ｙ，Ｚｏｕ Ｋ Ｆ，Ｑｉａｎ Ｗ，ｅｔ ａ１．Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｉｍｐｌｉｃａ— 正相关，表明ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８和ＮＦ－ Ｂ（Ｐ６５）表达水平可反映 ｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｌｌ—ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ＴＬＲ２，ＴＬＲ４ ａｎｄ ＴＬＲ９ ｉｎ ｃｏ— ＵＣ的活动情况，有助于判断患者的病情发展情况。 ｌｏｎｉｃ ｍｕｃｏｓａ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｊ Ｈｕａ— 综上所述，ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８和ＮＦ＿ＫＢ（Ｐ６５）参与了Ｕｃ的发 ｚｈｏｎｇ Ｕｎｉｖ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇ，２０１４，３４（５）：７８５—７９０． 生、发展，临床可通过检测ＴＬＲ４、ＭｙＤ８８和ＮＦ－ｘＢ（Ｐ６５）水平 ［１１］Ｐａｎ Ｌ，Ｈｏｎｇ Ｌ，Ｈｏｎｇ Ｙ，ｅｔ ａ１．ＩＲＦ５，ｂｕｔ ｎｏｔ ＴＬＲ４，ＤＥ— 判断ＵＣ患者的疾病发展情况，并将信号通路作为ＵＣ的潜在 ＦＥＢ１，ｏｒ ＶＤＲ，ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒｉｓｋ ｏｆ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ 治疗靶点。 ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ａ Ｈａｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎ— ｔｅｒｏｌ，２０１３，４８（１０）：１１４５—１１５１． 参考文献 ［１２２ Ｍｏｈａｍｍａｄｉ Ｍ，Ｚａｈｅｄｉ ＭＪ，Ｎｉｋｐｏｏｒ ＡＲ，ｅｔ ａ１．Ｉｎｔｅｒｌｅｕ— ｒ１］Ｎｏｒｅｅｎ Ｍ，Ａｒｓｈａｄ Ｍ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＴＬＲ１，ＴＬＲ２，ＴＬＲ４， ｋｉｎ－１ ７ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ａｎｄ ＴＬＲ４ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｉｎ ｕｌｃｅｒａ— ＴＬＲ６，ａｎｄ ＴＩＲＡＰ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｗｉｔｈ ｄｉｓｅａｓｅ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｉｒａｎ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２０１３，１０（２）：８３—９２． ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ，２０１５，６２（２）：Ｉ－１９． ［１３］李晨，俞媛，范尧夫，等．芍黄安肠汤对溃疡结肠炎大鼠 ［２］Ｙｏｎｇ ｚ，Ｚｈｅｎ Ｓ，Ｚｈａｎｇ Ｘ，ｅｔ ａ１．ＴＩＰＥ２ ｐｌａｙ ａ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｒｏｌｅ ｉｎ ＴＬＲ４／ＭｙＤ８８／ＮＦ—ｘＢ信号通路的影响［Ｊ］．中国实验方 ＴＬＲ４一ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｔ ｈｅｌｐｅｒ １ ７ ｃｅｌｌ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｐａ— 剂学杂志，２０１４，２０（７）：１５１—１５５． ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ ｇｒａｖｉｓ［－Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ， ［１４］Ｋｅ Ｘ，Ｚｈｏｕ Ｆ，Ｇａｏ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｑｉｎｇ Ｈｕａ Ｃｈａｎｇ Ｙｉｎ ｅｘｅｒｔｓ ２０１５，１０（４）：６３５—６４４． ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ｃｏｌｉｔｉｓ；ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｆ－３］方文怡，柯晓，周凡，等．清化肠饮对溃疡性结肠炎小鼠 ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＴＬＲ４／ＮＦ－ｋａｐｐａ Ｂ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｉｎｔ Ｊ ＴＬＲ４／Ｎ Ｂ通路的影响［Ｊ］．中国中西医结合消化杂 Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２０１３，３２（４）：９２６—９３０． 志，２Ｏ１４，２２（８）：４１７－４２１． ［１５］方新华，吴鑫，朱雪梅，等．芍药内酯苷通过ＴＬＲ４通路对 ［４１ Ｇｕｏ ＱＳ，Ｘｉａ Ｂ，Ｊｉａｎｇ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ｏｆ ＣＤ１４ 大鼠溃疡性结肠炎的治疗作用及Ｔｏｌｌｉｐ表达的作用 ｇｅｎｅ ａｎｄ ＴＬＲ４ ｇｅｎｅ ａｒｅ ｎｏｔ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｕｌｃｅｒａｔｉｖｅ ［Ｊ］．中国药学（英文版），２０１６（５）：３６６—３７２． ｃｏｌｉｔｉｓ ｉｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ｐｏｓｔｇｒａｄ Ｍｅｄ Ｊ，２００５，８１ （９５８）：５２６—５２９． （收稿日期：２０１７－０１—０１修回日期：２０１７－０３—１６） （上接第２５１４页） ｃａｌ，ａｎｄ ｆｅｔａｌ ｍｉｄｄｌｅ ｃｅｒｅｂｒａｌａｒｔｅｒｉｅｓ Ｄｏｐｐｌｅｒ ｉｎ ｗｏｍｅｎ Ｄｏｐｐｌｅｒ ｆｌｏｗｍｅｔｒｙ ｏｆ ｏｐｈｔｈａｌｍｉｃ ａｒｔｅｒｉｅｓ ｆｏｒ ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｓｅｖｅｒｅ ｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ：ａ ｃａｓｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｈｙｐｅｒ— ｏｆ ｐｒｅ—ｅｃｌａｍｐｓｉａ［Ｊ］．Ｒｅｖ Ａｓｓｏｃ Ｍｅｄ Ｂｒａｓ，２０１４，６０（６）： ｔｅｎｓ Ｐｒｅｇｎａｎｃｙ，２０１６，３５（１）：９１—９９． ５３８—５４１． ［１４２张薇．硫酸镁对子痫前期患者子宫动脉、螺旋动脉及胎儿 ［１２］Ｇｕｅｒｃｉ Ｐ，Ｖｉａｌ Ｆ，Ｆｅｕｇｅａｓ Ｊ，ｅｔ ａ１．Ｃｅｒｅｂｒａｌ ｏｘｉｍｅｔｒｙ ａｓ— 血流动力学指标的影响研究［Ｊ］．海峡药学，２０１２，２４ ｓｅｓｓｅｄ ｂｙ ｎｅａｒ－ｉｎｆｒａｒｅｄ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ ｄｕｒｉｎｇ ｐｒｅｅｃｌａｍｐ— （１０）：２４３—２４４． ｓｉａ：ａｎ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎａｌ ｓｔｕｄｙ：ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ［１５］朴顺福，张妍，张宁，等．硫酸镁对子痫前期病人胎儿血流 ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｒｉｔ Ｃａｒｅ Ｍｅｄ，２０１４，４２（１１）：２３７９— 的影响［Ｊ］．青岛大学医学院学报，２０１５，５１（１）：７７—７９． ２３８６． ［１３］ Ｍａｇｅｄ ＡＭ，Ｈａｓｈｅｍ ＡＭ，Ｇａｄ Ａｌｌａｈ ＳＨ，ｅｔ ａ１．Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ （收稿日期：２０１７－０１－２３修回日期：２０１７－０３—１６） ｏｆ ｌｏａｄｉｎｇ ｄｏｓｅ ｏｆ ｍａｇｎｅｓｉｕｍ ｓｕｌｆａｔｅ ｏｎ ｕｔｅｒｉｎｅ，ｕｍｂｉｌｉ
